黃芪甲苷的測定

黃芪甲苷的測定(HPLC-ELSD法)
1.範圍
本標準適用於測定黃芪(Astragalus Root, RADIX ASTRAGALI,A.membranaceus(Fisch.)Bge豆科)中黃芪甲苷(astragaloside)的含量。

2.原理
黃芪甲苷在紫外區吸收差(它的 吸收波長為200.8nm),改用ELSD后,所用的流動相全部蒸發,不干擾測定,因此靈敏度高,而穩定性及重現性均符合測定要求。
3.試劑
3.1 重蒸水
3.2 乙腈(色譜純)
3.3 甲醇(分析純)
3.4 黃芪甲苷標準品(astragaloside Ⅳ,C41H68O14)

4. 儀器
4.1 高效液相色譜儀(配色譜工作站)
4.2 分析天平(1/10000)
4.3 超聲波清洗儀
4.4 0.45 m 微孔過濾器
4.5 ELSD檢測儀(Alltech 2000)
4.6容量瓶
4.7帶塞小玻璃瓶
4.8 色譜柱 Shimpack VP-ODS C18 5 m 4.6150mm
5.分析步驟
5.1黃芪甲甙標準品儲備溶液:稱取10mg黃芪甲甙標準品置於50ml的容量瓶中,用甲醇溶解,超聲冷卻定容,0.45 m微孔濾膜過濾,于冰箱中保存。
5.2黃芪甲甙標準品供試液:取黃芪甲甙標準儲備溶液0.0、1.0、2.0、3.0、5.0、7.0、9.0、10.0ml置於10ml的容量瓶中,用水稀釋到刻度,搖勻,即為供試液。
5.3 待測樣品供試液
5.3.1精確稱取50mg提取物于50ml容量瓶中,用甲醇超聲溶解,冷卻定容,0.45 m微孔濾膜過濾為供試液。
5.3.2精密稱取本品粗粉約1.5g,置索氏提取器中,加甲醇40ml,冷浸過夜,再加甲醇適量,回流4h,提取液回收甲醇並濃縮至干,殘渣加水10ml,微熱使溶解,用水飽和的正丁醇振搖提取3次,每次20ml,合併正丁醇提取液,用氨試液提取2次,每次20ml,棄去氨液,正丁醇液蒸干,殘渣加水3-5ml使溶解