黄芪甲苷的测定

黄芪甲苷的测定(HPLC-ELSD法)
1.范围
本标准适用于测定黄芪(Astragalus Root, RADIX ASTRAGALI,A.membranaceus(Fisch.)Bge豆科)中黄芪甲苷(astragaloside)的含量。

2.原理
黄芪甲苷在紫外区吸收差(它的 吸收波长为200.8nm),改用ELSD后,所用的流动相全部蒸发,不干扰测定,因此灵敏度高,而稳定性及重现性均符合测定要求。
3.试剂
3.1 重蒸水
3.2 乙腈(色谱纯)
3.3 甲醇(分析纯)
3.4 黄芪甲苷标准品(astragaloside Ⅳ,C41H68O14)

4. 仪器
4.1 高效液相色谱仪(配色谱工作站)
4.2 分析天平(1/10000)
4.3 超声波清洗仪
4.4 0.45 m 微孔过滤器
4.5 ELSD检测仪(Alltech 2000)
4.6容量瓶
4.7带塞小玻璃瓶
4.8 色谱柱 Shimpack VP-ODS C18 5 m 4.6150mm
5.分析步骤
5.1黄芪甲甙标准品储备溶液:称取10mg黄芪甲甙标准品置于50ml的容量瓶中,用甲醇溶解,超声冷却定容,0.45 m微孔滤膜过滤,于冰箱中保存。
5.2黄芪甲甙标准品供试液:取黄芪甲甙标准储备溶液0.0、1.0、2.0、3.0、5.0、7.0、9.0、10.0ml置于10ml的容量瓶中,用水稀释到刻度,摇匀,即为供试液。
5.3 待测样品供试液
5.3.1精确称取50mg提取物于50ml容量瓶中,用甲醇超声溶解,冷却定容,0.45 m微孔滤膜过滤为供试液。
5.3.2精密称取本品粗粉约1.5g,置索氏提取器中,加甲醇40ml,冷浸过夜,再加甲醇适量,回流4h,提取液回收甲醇并浓缩至干,残渣加水10ml,微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用氨试液提取2次,每次20ml,弃去氨液,正丁醇液蒸干,残渣加水3-5ml使溶解